Bakgrunn og formål
Hjertesvikt er den vanligste dødsårsaken i den vestlige verden. Pasienter med hjertesvikt har en dårlig prognose selv ved optimal medikamentell behandling. For å utvikle nye og bedre behandlingstilbud er det essensielt å forstå bakgrunnen og mekanismene som ligger til grunn for hjertesvikt. Protein X er opprinnelig karakterisert som et nevroprotein og har viktige effekter i hjernen. Tidligere har man antatt at dette proteinet kun eksisterte i nerveceller, men nyere forskning har vist at protein X også opptrer i andre celle- og vevstyper.
Patofysiologien for protein X ved hjertesvikt er foreløpig ikke kjent. Vi har utført en rekke forsøk med protein X som vi her ønsker å videreføre (FOTS id 6178). Resultatene våre viser at protein X finnes i hjertet, og at nivåer av dette proteinet oppreguleres ved hjertesvikt i dyremodeller. Vi har protein X knock-out (KO) mus som vi har som vi har utført aorta banding-inngrep for å studere effekten av proteinet ved hjertesvikt. Vi fant økt kortidsmortalitet hos protein X KO mus, men ingen forandring av hjertets funksjon med ekkokardiografi. Vi ønsker å studere hva som er grunnen for tidlig død hos protein X KO mus. Vi har også studert isolerte hjerteceller fra protein X mus og funnet at kalsiumhåndteringen er dysfunksjonell med økt kalsium lekkasje, og vi har sett at nivåer av noen ionekanaler er regulert hos protein X KO mus. Her ønsker vi å undersøke hva mekanismen for dette er og om dette har sammenheng med kortidsmortalitet hos protein X mus. Våre funn så langt indikerer at protein X spiller en sentral rolle i hjertet og vi ønsker å kartlegge dette videre. Dette prosjektet kan gi økt forståelse for hva som går galt i hjertet ved arytmi og plutselig død. Det kan også ha et terapeutisk potensiale og gi forbedret grunnlag for fremtidig pasientbehandling.
Metode
Vi ønsker å utføre aorta banding-inngrep og telemetri måling for å undersøke om protein X KO mus dør av arytmi. Vi kommer til å undersøke funksjonen til protein X i vev fra hjertet og i isolerte hjerteceller. Her kommer vi til å kartlegge funksjon av protein X med en rekke metoder som konfokalmikroskopering, elektronmikroskopi, western blot og qRT-PCR. Vi ønsker å bruke protein X KO mus og C57BL/6N mus som kontroll. Vi trenger 612 dyr til forsøkene.
Vi ønsker å studere dette i en protein X musemodell da in vitro modeller ikke kan gi svar på våre problemstillinger, og den beste etterligningen av prosessene i mennesker oppnås ved bruk av dyremodeller. Vi bruker så lavt antall som mulig i forsøkene våre. I tillegg sørger vi for å bruke alt vevet. Vi forbedrer også kontinuerlig våre metoder for å øke suksessraten, dette gjelder operasjonsteknikker, celleisolering og in vitro forsøk. For dette prosjektet har vi sikret at medarbeidere med spesifikk erfaring står for de enkelte operasjonene.
Hjertesvikt er den vanligste dødsårsaken i den vestlige verden. Pasienter med hjertesvikt har en dårlig prognose selv ved optimal medikamentell behandling. For å utvikle nye og bedre behandlingstilbud er det essensielt å forstå bakgrunnen og mekanismene som ligger til grunn for hjertesvikt. Protein X er opprinnelig karakterisert som et nevroprotein og har viktige effekter i hjernen. Tidligere har man antatt at dette proteinet kun eksisterte i nerveceller, men nyere forskning har vist at protein X også opptrer i andre celle- og vevstyper.
Patofysiologien for protein X ved hjertesvikt er foreløpig ikke kjent. Vi har utført en rekke forsøk med protein X som vi her ønsker å videreføre (FOTS id 6178). Resultatene våre viser at protein X finnes i hjertet, og at nivåer av dette proteinet oppreguleres ved hjertesvikt i dyremodeller. Vi har protein X knock-out (KO) mus som vi har som vi har utført aorta banding-inngrep for å studere effekten av proteinet ved hjertesvikt. Vi fant økt kortidsmortalitet hos protein X KO mus, men ingen forandring av hjertets funksjon med ekkokardiografi. Vi ønsker å studere hva som er grunnen for tidlig død hos protein X KO mus. Vi har også studert isolerte hjerteceller fra protein X mus og funnet at kalsiumhåndteringen er dysfunksjonell med økt kalsium lekkasje, og vi har sett at nivåer av noen ionekanaler er regulert hos protein X KO mus. Her ønsker vi å undersøke hva mekanismen for dette er og om dette har sammenheng med kortidsmortalitet hos protein X mus. Våre funn så langt indikerer at protein X spiller en sentral rolle i hjertet og vi ønsker å kartlegge dette videre. Dette prosjektet kan gi økt forståelse for hva som går galt i hjertet ved arytmi og plutselig død. Det kan også ha et terapeutisk potensiale og gi forbedret grunnlag for fremtidig pasientbehandling.
Metode
Vi ønsker å utføre aorta banding-inngrep og telemetri måling for å undersøke om protein X KO mus dør av arytmi. Vi kommer til å undersøke funksjonen til protein X i vev fra hjertet og i isolerte hjerteceller. Her kommer vi til å kartlegge funksjon av protein X med en rekke metoder som konfokalmikroskopering, elektronmikroskopi, western blot og qRT-PCR. Vi ønsker å bruke protein X KO mus og C57BL/6N mus som kontroll. Vi trenger 612 dyr til forsøkene.
Vi ønsker å studere dette i en protein X musemodell da in vitro modeller ikke kan gi svar på våre problemstillinger, og den beste etterligningen av prosessene i mennesker oppnås ved bruk av dyremodeller. Vi bruker så lavt antall som mulig i forsøkene våre. I tillegg sørger vi for å bruke alt vevet. Vi forbedrer også kontinuerlig våre metoder for å øke suksessraten, dette gjelder operasjonsteknikker, celleisolering og in vitro forsøk. For dette prosjektet har vi sikret at medarbeidere med spesifikk erfaring står for de enkelte operasjonene.